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外泌體提取

服務介紹:
外泌體(exosome):是細胞主動向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡樣小體,該囊泡可攜帶多種蛋白質、mRNA、miRNA等,參與細胞通訊、細胞遷移、血管新生和腫瘤細胞生長等過程。根據外泌體的大小和密度,用不同的離心速度,達到分離出外泌體的超速(差速)離心法,是學術上用的比較多且較認可的外泌體的提取方法,被認為是外泌體提取的黃金方法。

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  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-12-02
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詳細介紹

服務介紹:

外泌體(exosome):是細胞主動向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡樣小體,該囊泡可攜帶多種蛋白質、mRNA、miRNA等,參與細胞通訊、細胞遷移、血管新生和腫瘤細胞生長等過程。根據外泌體的大小和密度,用不同的離心速度,達到分離出外泌體的超速(差速)離心法,是學術上用的比較多且較認可的外泌體的提取方法,被認為是外泌體提取的黃金方法。

囊泡

大小(nm)

密度(g/mL)

來源

標記

外泌體

40-200

1.13-1.18

內體(endosomes)

tetraspanins, Alix, TSG101,CD4,CD9

微泡

200-2000

1.16-1.19

質膜(plasma membrane )

integrins, selectins, CD40

凋亡小體

500-2000

1.16-1.28

質膜,內質網(plasma membrane, endoplasmic reticulum)

phosphatidylserine, genomic DNA

Ref: Huilin Shao et al,New Technologies for Analysis of Extracellular Vesicles,Chem.Rev. 2018,118:1917-1950

外泌體應用領域:

外泌體參與不同細胞間的物質傳輸和信號傳遞;

外泌體具備一些免疫調節功能(由于有大量免疫相關分子:抗原傳遞分子、熱休克蛋白等);

外泌體參與細胞廢物的排泄和處理;

不同來源的外泌體有其特異性,存在著不一樣的功能;

外泌體已廣泛的被用在醫學臨床疾病的診斷以及相關預防研究上;

外泌體可能被當做一種藥物的載體等

名稱

規格

外泌體提取

 

  實驗流程:

低速離心去除碎片-過濾-高速離心-超速離心-蛋白濃度檢測

注:外泌體 提取后,可另收費進行電鏡負染和WB檢測(tsg101,cd9,cd63三選二) 

送樣運輸要求:

細胞上清樣本:一個樣本提供70ml的培養上清(細胞在含常規FBS培養基中培養一定時間,待細胞融合度約為60% - 70%時,移去原有含FBS的培養基,換成新鮮的含無外泌體血清的培養基,繼續培養3天左右,細胞融合度達到80%-95%左右時,收取細胞上清),干冰運輸到實驗室。

血清樣本:血液經普通采-血管采集后室溫靜置30min,3000g離心15min,收集上層血清,5ml,-80℃純干冰運輸。

 

 



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