【簡(jiǎn)介】

黃曲霉毒素B1(AflatoxinB1，AFB1)是由生長(zhǎng)在食物及飼料中的黃曲霉菌、曲霉菌等代謝產(chǎn)生的一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)似的真菌毒素。目前已分離鑒定出17種，主要是黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2，以及由B1和B2在體內(nèi)經(jīng)過(guò)羥化而衍生成的代謝產(chǎn)物M1和M2等。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1zui多見(jiàn)，毒性zui強(qiáng)，

已被WHO劃定為一類(lèi)致癌物。

本產(chǎn)品利用免疫層析技術(shù)原理來(lái)定性檢測(cè)糧食類(lèi)及其發(fā)酵產(chǎn)物中的黃曲霉毒素B1殘留，具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短、可通過(guò)肉眼直接判讀結(jié)果的特點(diǎn)，適用于各類(lèi)企業(yè)、檢測(cè)機(jī)構(gòu)的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

【適用范圍】

適用于糧食作物（玉米、大米、豆類(lèi)、花生等）及其發(fā)酵產(chǎn)物（醬油、食醋、食用油、米酒等）產(chǎn)品中黃曲霉毒素B1的定性篩查檢測(cè)。

【檢測(cè)下限】

樣品中黃曲霉毒素B1檢測(cè)下限為1 ppb（μg/kg）。

【試劑盒組成】

檢測(cè)卡：10份(含微孔） 樣品稀釋液：1瓶Na2CO3粉末1包

15mL離心管：10個(gè)一次性吸管：10根說(shuō)明書(shū)1份

【規(guī)格】10份次

【檢測(cè)所需但未提供的試劑、器具】

移液器、計(jì)時(shí)器、小玻璃杯、正己烷（分析純）、乙酸乙酯（分析純）、氮(空)氣吹干機(jī)或電吹風(fēng)

【試劑配制】

測(cè)試醬油、醋所需：1包Na2CO3粉末用100 mL超純水溶解，配置成50 mM Na2CO3溶液。

【樣品處理】

（一）谷物和飼料：

1、取5 g以上有代表性的樣品粉碎，稱取2.0 g均勻粉碎樣加入到15 mL離心管中；

2、向離心管中準(zhǔn)確加入2 mL純凈水和8 mL乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分震蕩5 min，然后靜置1min

（注意：如上清不足3 mL，以4000 rpm離心1分鐘）；

3、用吸管取3 mL上清液到小玻璃杯中，用電吹風(fēng)（不要過(guò)高溫度）或60℃氮(空)氣吹干；

4、溶劑吹干后，滴加4滴（約200μL）樣品稀釋液溶解殘留物，震蕩使其混勻，待檢。

（二）食用油：

1、準(zhǔn)確稱取2.0 g油樣于15 mL離心管中；

2、準(zhǔn)確加入8 mL的正己烷及4 mL純凈水，蓋緊離心管蓋，充分震蕩3 min，小心吸去上層液體；

3、再加入4 mL乙酸乙酯，蓋緊離心管蓋，充分震蕩5 min，靜置或4000 rpm離心1分鐘；

4、轉(zhuǎn)移3 mL上清液到一個(gè)干凈的小玻璃杯或其它小容器中，用電吹風(fēng)（不要過(guò)高溫度）吹干或60℃氮(空)氣吹干；

5、溶劑吹干后，滴加4滴（約200μL）樣品稀釋液溶解殘留物，震蕩使其混勻，待檢。

（三）醬油、醋：

1、準(zhǔn)確量取2 mL樣品于15 mL離心管中；

2、準(zhǔn)確加入4 mL乙酸乙酯，蓋緊離心管蓋，充分震蕩5 min，靜置1~2 min，讓待測(cè)液分層；

3、將上清液用吸管全部轉(zhuǎn)移到另一個(gè)15 mL離心管中；

4、加入2mL 50mM Na2CO3溶液（若是米醋，建議用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值到6.0-8.0之間），充分震蕩3 min；

5、轉(zhuǎn)移3 mL上清液到一個(gè)干凈的小玻璃杯或其它小容器中，用電吹風(fēng)（不要過(guò)高溫度）吹干或60℃

氮(空)氣吹干；

6、溶劑吹干后，滴加4滴（約200μL）樣品稀釋液溶解殘留物，震蕩使其混勻，待檢。

敬告用戶：使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)！

（四）發(fā)酵酒：

1、準(zhǔn)確量取2 mL樣品于15ml離心管中；

2、準(zhǔn)確加入4 mL乙酸乙酯，蓋緊離心管蓋，充分震蕩5 min；

3、靜置1~2 min，讓待測(cè)液分層；

4、轉(zhuǎn)移3 mL上清液到一個(gè)干凈的小玻璃杯或其它小容器中，用電吹風(fēng)（不要過(guò)高溫度）吹干或60℃

氮(空)氣吹干；

5、溶劑吹干后，滴加4滴（約200μL）樣品稀釋液溶解殘留物，震蕩使其混勻，待檢。

【檢測(cè)步驟】

1、使用前將檢測(cè)卡和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫。

2、從包裝袋中取出檢測(cè)卡，將檢測(cè)卡平放。

3、用移液槍移取100ul待測(cè)液于微孔中，反復(fù)吹打3-5次，混合均勻，靜置5min,用一次性吸管轉(zhuǎn)移

液體至加樣孔中。

4、加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)，5～8分鐘即可觀察結(jié)果，10min后判讀無(wú)效。

注意：滴加樣品的滴管必須一次性使用，防止出現(xiàn)交叉污染。

【結(jié)果判定】

陰性（－）：若質(zhì)控線（C線）和檢測(cè)線（T線）均顯色，表示待測(cè)樣品中不含黃曲霉毒素B1或者低

于檢測(cè)下限。

陽(yáng)性（＋）：若僅質(zhì)控線（C線）顯色，檢測(cè)線（T線）不顯色，表示待測(cè)樣品中可能含黃曲霉毒素B1。

無(wú)效：若質(zhì)控線（C線）不顯色，表示存在不正確的操作過(guò)程或檢測(cè)卡已變質(zhì)失效。

在此情況下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，并用新的檢測(cè)卡重新測(cè)試。

【檢測(cè)方法的局限性】

1、該產(chǎn)品只能做樣本中的黃曲霉毒素B1的定性篩查，不能確定其含量。

2、該產(chǎn)品僅提供初步的篩查結(jié)果，必要時(shí)可用氣相色譜或氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)機(jī)進(jìn)行確證分析。

3、操作失誤，以及標(biāo)本中存在干擾物質(zhì)，有可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

【注意事項(xiàng)】

1、試驗(yàn)前檢查鋁箔包裝袋是否破損，如損壞則不能使用，以免出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。

2、檢測(cè)卡從鋁膜袋中取出后，應(yīng)于1 h內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，置于空氣中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，檢測(cè)卡會(huì)受潮失效。

3、實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持一定濕度、避風(fēng)，避免在過(guò)高溫度下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

4、檢測(cè)卡在常溫下保存，謹(jǐn)防受潮，低溫下保存的檢測(cè)卡應(yīng)平衡至室溫方可使用。

5、本檢測(cè)卡為一次性使用，并在有效期內(nèi)使用。

【貯藏條件和有效期】

儲(chǔ)存條件：常溫(4~30℃)下，陰涼避光干燥處，不得凍存

有效期：12個(gè)月